Detección e identificación de 'Candidatus Phytoplasma prunorum' en germoplasma de Prunus

Resumen

La caracterización molecular del agente causante de enfermedades asociadas a varios síntomas, como el enrollamiento clorótico, anticipación de la floración y la brotación, leptonecrosis o amarillamiento en los frutales de hueso permitió determinar una etiología común, el fitoplasma 'European stone fruit yellows', recientemente clasificado taxonómicamente como 'Candidatus Phytoplasma prunorum'. Durante dos años se llevó a cabo una prospección en dos colecciones del Centro de Investigación y Tecnología Agroalimentaria (CITA) de Aragón, que comprende diferentes especies e híbridos interespecíficos, de origen europeo y japonés, dentro del género Prunus. Se observaron síntomas de anticipo de floración y brotación en invierno y cierto decaimiento. Con objeto de identificar al posible fitoplasma causante de la enfermedad se aplicaron dos métodos en todos los árboles inspeccionados. El primero fue una PCR anidada con cebadores específicos del grupo 16Sr X seguida de un análisis de los fragmentos de restricción por RFLP. El segundo método fue una PCR con cebadores específicos de 'Ca P. prunorum' (Eca1/Eca2). En los árboles más sintomáticos se confirmó la presencia de los fitoplasmas
por uno de los dos métodos, obteniéndose resultados negativos en los árboles asintomáticos. El primer método resultó ser más fiable que la PCR directa como método de diagnóstico rutinario.