Comunicación corta. El N-(2-cloro-4-piridil)-N-fenilurea (4CPPU) mejora la regeneración in vitro vía organogénesis directa de segmentos de epicótilo deCitrus aurantium L. en comparación con otras citoquininas de uso común
Resumen
Se evaluó el efecto de tres concentraciones de cinco diferentes citoquininas [6-bencilaminopurina; 2-isopentil adenina; kinetina (Kin), tidiazurón y N-(2-cloro-4-piridil)-N-fenilurea (4-CPPU)], en la organogénesis directa in vitro deexplantes de epicótilo de naranjo amargo (Citrus aurantium L.). Se incubaron durante 45 días explantes de epicótilo
en medio Murashige y Tucker suplementado con las cinco citoquininas. La adición de Kin y 4-CPPU en el medio aumentó
la organogénesis directa de segmentos de epicótilo de naranjo amargo. Se combinó la concentración que dio mejores resultados de cada uno de estas dos citoquininas con ácido indol-3-acético (IAA) o con ácido α-naftaleno acético (α-NAA) en concentraciones desde 0,01 hasta 0,2 mg L–1. La inclusión de IAA a 0,2 mg L–1 en el medio con 4-CPPU a 0,05 mg L–1 resultó en un 100% de éxito en la organogénesis directa, mientras que la combinación de Kin a 0,25 mg L–1 con IAA o α-NAA, ambas a 0,01 mg L–1, resultó en un 91,7% de organogénesis. La incubación de los brotes producidos en medio suplementado con ácido indol-3-butírico ó α-NAA resultó en altos porcentajes de enraizamiento (hasta un 90%) y los explantes enraizados se aclimataron con éxito (85%) en un mist. Se ha utilizado el 4-CPPU en el cultivo in vitro de diferentes especies, pero este es el primer informe sobre su uso en la organogénesis directa de cítricos y podría ser de gran valor en los protocolos de transformación genética de segmentos de epicótilo de cítricos, ya que esta citoquinina produjo un 100% de organogénesis.
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Citas
Arinaitwe G., Rubaihayo P.R., Magambo M.J.S., 2000. Proliferation rate effects of cytokinins on banana (Musa spp.) cultivars. Sci Hortic 86, 13-21. http://dx.doi.org/10.1016/S0304-4238(00)00124-2
Azevedo F.A., Mourao F.A.A., Mendes B.M.J., Almeida W.A.B., Schinor E.H., Pio R., Barbosa J.M., Guidetti-González S., Carrer H., Lam E., 2006. Genetic transformation of Rangpur lime (Citrus limonia Osbeck) with the b0 (bacterio-opsin) gene and its initial evaluation for Phytophthora nicotianae resistance. Plant Mol Biol Rep 24, 185-196. http://dx.doi.org/10.1007/BF02914057
Bordon Y., Guardiola J.L., García-Luis A., 2000. Genotype affects the morphogenic response in vitro of epicotyl segments of Citrus rootstocks. Ann Bot-London 86, 159-166. http://dx.doi.org/10.1006/anbo.2000.1177
Cervera M., Navarro A., Navarro L., Pena L., 2008. Production of transgenic adult plants from Clementine mandarin by enhancing cell competence for transformation and regeneration. Tree Physiol 28, 55-66. http://dx.doi.org/10.1093/treephys/28.1.55 PMid:17938114
Costa M.G.C., Alves V.S., Lani E.R.G., Mosquim P.R., Carvalho C.R., Otoni W.C., 2004. Morphogenic gradients of adventitious bud and shoot regeneration in epicotyl explants of Citrus. Sci Hortic 100, 63-74. http://dx.doi.org/10.1016/j.scienta.2003.08.007
Duan Y.X., Liu X., Fan J., LI D.L., Wu R.C., Guo W.W., 2007. Multiple shoot induction from seedling epicotyls and transgenic citrus plant regeneration containing the green fluorescent protein gene. Bot Stud 48, 165-171.
Duran-Vila N., Gogorcena Y., Ortega V., Ortiz J., Navarro L., 1992. Morphogenesis and tissue-culture of sweet orange [Citrus sinensis (L) osb)]- effect of temperature and photosynthetic radiation. Plant Cell Tiss Org 29, 11-18. http://dx.doi.org/10.1007/BF00036140
Germana M.A., Macaluso L., Patricolo G., Chiancone B., 2008. Morphogenic response in vitro of epicotyl segments of Citrus macrophylla. Plant Biosyst 142, 661-664. http://dx.doi.org/10.1080/11263500802411395
Gutiérrez M.A., Luth D., Moore G.A., 1997. Factors affecting Agrobacterium-mediated transformation in Citrus and production of sour orange (Citrus aurantium L.) plants expressing the coat protein gene of citrus tristeza virus. Plant Cell Rep 16, 745-753. http://dx.doi.org/10.1007/s002990050313
Koenig F., Brannath W., Bretz F., Posch M., 2008. Adaptive Dunnett tests for treatment selection. Stat Med 27, 1612-1625. http://dx.doi.org/10.1002/sim.3048 PMid:17876763
Magioli C., Rocha A.P.M., De Oliveira D.E., Mansur E., 1998. Efficient shoot organogenesis of eggplant (Solanum melongena L.) induced by thidiazuron. Plant Cell Rep 17, 661-663. http://dx.doi.org/10.1007/s002990050461
Molina R.V., Castello S., García-Luis A., Guardiola J.L., 2007. Light cytokinin interactions in shoot formation in epicotyl cuttings of Troyer citrange cultured in vitro. Plant Cell Tiss Org 89, 131-140. http://dx.doi.org/10.1007/s11240-007-9221-8
Moreira-Dias J.M., Molina R.V., Bordon Y., Guardiola J.L., Garcáa-Luis A., 2000. Direct and indirect shoot organogenic pathways in epicotyl cuttings of Troyer citrange differ in hormone requirements and in their response to light. Ann Bot 85, 103-110. http://dx.doi.org/10.1006/anbo.2000.1001
Murashige T., Tucker D.P.H., 1969. Growth factor requirements of Citrus tissue culture. Proc 1st Intnl Citrus Symposium. Univ California, Riverside, CA, USA. pp. 1155-1161.
Pena L., Cervera M., Juárez J., Ortega C., Pina J.A., Duran-Vila N., Navarro L., 1995. High-effi ciency agrobacterium-mediated transformation and regeneration of citrus. Plant Sci 104, 183-191. http://dx.doi.org/10.1016/0168-9452(94)04021-8
Pérez-Molphe-Balch E., Ochoa-Alejo N., 1997. In vitro plant regeneration of Mexican lime and mandarin by direct organogenesis. Hortscience 32, 931-934.
Sharma S., Prakash A., Tele A., 2009. In vitro propagation of citrus rootstocks. Not Bot Hort Agrobot 37, 84-88.
Siragusa M., Carra A., Salvia L., Puglia A.M., Pasquale F., Carimi F., 2007. Genetic instability in calamondin (Citrus madurensis Lour.) plants derived from somatic embryogenesis induced by diphenylurea derivatives. Plant Cell Rep 26, 1289-1296. http://dx.doi.org/10.1007/s00299-007-0326-7 PMid:17333016
Tavano E.C.R., Stipp L.C.L., Muniz F.R., Mourao F.A.A., Mendes B.M.J., 2009. In vitro organogenesis of Citrus volkameriana and Citrus aurantium. Biol Plantarum 53, 395-399. http://dx.doi.org/10.1007/s10535-009-0075-2
Vinayak V., Dhawan A.K., Gupta V.K., 2009. Efficacy of non-purine and purine cytokinins on shoot regeneration in vitro in sugarcane. Indian J Biotechnol 8, 227-231.
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