Método selectivo de PCR para la identificación de Phytophthora hibernalis Carne

Resumen

La podredumbre marrón del fruto en cítricos ha ocasionado importantes pérdidas económicas en pre y postcosecha en todo el mundo. Por lo general esta enfermedad está provocada por varias especies de Phytophthora. En España, P. citrophthora es el principal agente causante de esta patología, sin embargo, en los últimos años, P. hibernalis Carne ha sido detectado ocasionando daños en limoneros y naranjos localizados en el noroeste del país. En el presente trabajo, se ha desarrollado un método de PCR para el diagnóstico de P. hibernalis tanto a partir de micelio en cultivo como directamente de lesiones del fruto. Se diseñó un par de primers específicos, PHIB1 y PHIB2, a partir de secuencias de las regiones ITS1 e ITS2. Estos dos primers amplificaron un fragmento de 407 pb, que fue secuenciado (Acc. No. AY827556). Los resultados demostraron que la amplificación por PCR de las regiones ITS mediante los primers PHIB1 y PHIB2 seguida por la secuenciación del ADN permiten una identificación rápida, selectiva y fiable de P. hibernalis.