Análisis de los factores externos que afectan a la formación y acumulación de los D-RNAs en infecciones de Bromovirus

Resumen

Los RNAs defectivos (D-RNAs) están siendo estudiados en diversos virus RNA de plantas. En el género Bromovirus se han descrito D-RNAs en el virus del moteado del haba (BBMV), formados mediante una delección interna en el RNA2, que se generan de novo mediante pases seriados del virus sobre un nuevo huésped. En contraste, en el virus del mosaico del bromo (BMV), los D-RNAs se forman por una o dos delecciones en el RNA3 sin necesidad de pases en sus huéspedes. En este trabajo estudiamos algunos factores externos, como los huéspedes, las inoculaciones y las temperaturas de crecimiento en la generación y acumulación de D-RNAs en BBMV, BMV y en el virus del moteado clorótico de la carilla (CCMV). Los D-RNAs de BBMV y BMV fueron generados y acumulados mediante pases seriados y sin pases de los virus en diferentes huéspedes y cultivares. Plantas inoculadas con BBMV y BMV sin D-RNAs, mantenidas a 12, 16, 20 y 24 grados C en cámaras de crecimiento a temperatura constante o en un invernadero (22 +/- 5 grados C), generaron D-RNAs con o sin pases sobre nuevos huéspedes. Los D-RNAs observados en ambos virus presentan algunas características en común: son formados de novo mediante pases seriados o purificados de hojas infectadas algunas semanas después de la inoculación; los bordes de la delección tienen secuencias repetidas, y secuencias palindrómicas que favorecen la recombinación; además, el crecimiento de las plantas inoculadas a bajas temperaturas favorece la formación y acumulación de D-RNAs. CCMV, después de diversos pases del virus o sin pases, no generó moléculas defectivas en plantas de Vigna unguiculata o Nicotiana benthamiana. Es la primera vez que se han generado D-RNAs en BBMV sin necesidad de pases y en BMV mediante pases seriados.