Electroactivación de oocitos de pez cebra (Danio rerio)

Resumen

En pez cebra, una vez que los oocitos son descargados del estroma ovárico, su activación inicial por contacto en agua da lugar a divisiones normales únicamente cuando son fertilizados. Cuando no se utiliza semen (inactivado genéticamente o no), las técnicas reproductivas (como transplante nuclear o inyección espermática intracitoplasmática) son ineficientes. En el presente trabajo se desarrollaron tres experimentos de activación oocitaria por estímulos eléctricos: en el primero de ellos, se compararon seis tratamientos de activación (Voltaje × Pulsos: 2,76× ×1; 2,76 × 2; 2,76 × 3 y 5,40 × 1; 5,40 × 2; 5,40 × 3). El grupo 5,4 × 3 mostró los mejores resultados (32% de activación). En el segundo experimento, se evaluó un tratamiento eléctrico de 20 min de duración. El tratamiento consistió en la aplicación de una secuencia de tres estímulos iguales cada 10 min (de 1 ó 3 pulsos de corriente continua y onda cuadrada de 20 μs de duración cada uno y evaluado a dos niveles de voltaje: 2,76 V y 5,4 V). En este trabajo se observó que el número de pulsos afectó negativamente a los oocitos, incrementándose los porcentajes de oocitos dañados y lisados. Además, la combinación de 20 min y 3 pulsos consecutivos de 2,76 V logró diferencias significativas con su grupo control (43% vs 18% oocitos activados, p < 0,05). En el tercer experimento, se observaron efectos negativos como consecuencia del envejecimiento oocitario. En conclusión, el mejor tratamiento de activación para oocitos de pez cebra intactos (no manipulados) fue la secuencia B3. El estímulo de activación eléctrica propuesto sería el único disponible una vez que los oocitos han sido activados por agua.